名称:乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒
品牌:PERFEMIKER
货号:PM23636
规格:500T/纯度:>N/A/价格:¥608.00
规格:100T/纯度:>N/A/价格:¥220.00
链接:https://www.perfemiker.cn/product/1002834.html
乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒是一种基于比色法量化细胞毒性与细胞膜完整性的酶联检测试剂,品牌 PERFEMIKER(货号 PM23636),提供 100T / 500T 规格,于 -25~-15℃ 避光保存,有效期 1 年。本品采用 diaphorase(硫辛酰胺脱氢酶)催化的 INT 显色体系,通过比色法检测细胞毒性时释放的 LDH 活性,亦可用于其它样品中 LDH 活性的定量。
LDH 是几乎存在于所有真核细胞胞质中的稳定酶蛋白;细胞因凋亡或坏死导致质膜结构破坏时,胞浆内 LDH 释放至培养液中。通过检测释放到上清中的 LDH 活性,即可定量评价细胞毒性与细胞膜完整性。该释放法被视为传统放射性 ?1Cr 标记释放法的安全、有效替代方案,非放射性、即用便捷、灵敏度高、重复性好。
本品广泛应用于药物毒性筛选、化学物质与环境毒理评价、免疫细胞杀伤(NK/CTL)、抗肿瘤药物评价、化妆品与医疗器械生物安全性评价及细胞死亡机制研究等领域。产品配套反应缓冲液、底物混合液、终止液与对照体系,规范储存条件下性能稳定。
区别于代谢活性类方法(如 MTT/CCK-8),本品检测的是膜破裂释放的"死亡物质"而非活细胞代谢信号,不受细胞代谢状态波动干扰,尤其擅长区分坏死性死亡并定量膜损伤程度,是 cytotoxicity 研究的标杆级标准工具。
1、细胞膜损伤释放机制 LDH 为胞质稳定酶,正常状态下难透过完整质膜;当细胞受化学、物理或生物因素作用致膜结构受损(凋亡晚期/坏死),LDH 迅速释放至上清,其释放量直接反映不可逆膜损伤与细胞死亡程度。
2、偶联酶促显色机制 在 LDH 催化下,乳酸转化为丙酮酸,同时将 NAD? 还原为 NADH;随后 diaphorase 将 NADH 的氢转移给四唑盐 INT(2-p-碘苯基-3-硝基苯基四唑氯),将其还原为强生色甲臜(formazan)。
3、比色定量机制 生成的红色甲臜在 490/492 nm 处有最大吸收峰,吸光度与样品中 LDH 活性呈线性正相关;经自发释放与最大释放(如 Triton X-100 裂解)对照校正,即可换算细胞毒性百分比与 IC??。
4、非放射性安全替代机制 以稳定胞质酶释放替代放射性 ?1Cr 标记与计数,规避放射性危害与废液处理难题,操作安全、检测窗口宽,便于常规实验室与高通量平台推广。
5、膜完整性特异机制 检测对象为膜破裂释放的"死亡信号",不受细胞代谢活性、增殖状态差异影响,较代谢法(MTT/CCK-8)更能特异反映膜完整性损伤,利于坏死与死亡机制的准确区分。
1、药物毒性筛选与 IC?? 测定 在药物研发早期,测定不同浓度化合物处理后上清 LDH 活性,确定半数抑制浓度(IC??),快速排除高毒性候选,提升研发成功率。
2、毒理学与环境污染物评价 评估环境化学物质、食品添加剂、纳米颗粒及工业材料的细胞毒性,为食品安全、环境保护与新材料生物相容性提供客观量化依据。
3、免疫细胞杀伤活性评价 作为定量 NK 细胞、细胞毒性 T 淋巴细胞(CTL)及补体介导细胞毒性的金标准方法,精准评估效应细胞对靶细胞的杀伤效率。
4、癌症研究与抗肿瘤药物评价 检测抗肿瘤药物或疗法处理后肿瘤细胞的死亡释放,量化治疗诱导的膜损伤与细胞毒性,支撑药效与机制研究。
5、化妆品与医疗器械生物安全性评价 用于化妆品原料、医疗器械与生物材料的细胞毒性(膜完整性)评价,满足安全性合规检测需求。
6、细胞死亡机制与基础科研 结合 Annexin V/PI、Caspase 等检测,系统解析凋亡、坏死及免疫杀伤中的膜完整性变化,支撑细胞死亡通路研究。
使用方法 铺板与处理:将细胞接种于 96 孔板,按实验条件加待测物处理;同步设自发释放对照(未处理)与最大释放对照(如 1% Triton X-100 裂解)。 上清收集:孵育结束后取各孔上清转移至新板(避免扰动贴壁细胞)。 反应体系:向上清孔加入反应缓冲液与底物混合液(含乳酸、NAD?、INT、diaphorase),室温避光孵育 15–30 min。 终止与读数:加终止液后,用酶标仪于 490/492 nm 测吸光度;按公式换算细胞毒性% 与 IC??。
注意要点 本品为低温试剂,使用前平衡至室温并轻柔混匀,避免反复冻融;未用完组分及时回冻。 血清含内源 LDH,建议培养液中血清浓度不超过 1%,或采用热灭活血清,以降低背景干扰。 待测化合物若具还原性或有色,可能干扰显色反应,建议先做干扰预实验并设相应溶剂对照。 操作佩戴手套,避免接触皮肤与黏膜;显色反应避光进行以保证读数稳定。 仅限实验室科研与合规检测使用,严禁临床诊疗;剩余试剂按生物/化学废弃物规范处置。
乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒凭借非放射性安全、膜完整性特异、灵敏度高、操作简便、高通量兼容等核心优势,成为药物筛选、毒理学评价、免疫细胞杀伤与细胞死亡机制研究领域的黄金标准工具。有效解决 ?1Cr 放射性法危害大、代谢法易受增殖/代谢干扰等行业痛点,全面满足药企研发、检测机构、高校院所与医疗器械评价的高精度需求。
当前基于本品搭建的药物毒性筛选平台、环境纳米毒理评价体系、NK/CTL 杀伤定量方案及材料生物相容性检测流程,已广泛支撑新药发现、食品安全、免疫治疗与再生医学等核心项目。随着高通量自动化、荧光高灵敏与多重联检技术持续升级,LDH 比色法将在精准医学、药物安全与细胞死亡研究等领域持续发挥关键支撑作用,为全球科研与产业提供客观准确、稳定可靠的细胞毒性量化保障,助力研发效率提升与成果转化。