描述

SR1078 是一种视黄酸受体相关孤儿受体 (RORα/RORγ) 激动剂。

相关类别

信号通路 >> 代谢酶/蛋白酶 >> ROR

研究领域 >> 癌症

靶点

RORα/γ[1]

体外研究

SR1078是合成的RORα/RORγ配体。 SR1078在生化测定中调节RORγ的构象并激活RORα和RORγ驱动的转录。此外，SR1078刺激表达RORα和RORγ的HepG2细胞中内源性ROR靶基因的表达。在基于细胞的嵌合受体Gal4 DNA结合域-NR配体结合域共转染测定中，SR1078显着抑制RORα和RORγ的组成型反式激活活性，但对FXR，LXRα和LXRβ的活性没有影响。在RORα共转染测定中，用SR1078（10μM）处理细胞导致转录显着增加。类似地，在RORγ共转染试验中，SR1078处理导致RORγ依赖性转录活性的刺激[1]。

体内研究

在小鼠中检查SR1078的药代动力学特性并注意到显着的暴露。腹腔注射SR1078 10 mg / kg后1 h血药浓度达到3.6μM，单次注射后8 h甚至持续水平高于800 nM。这些水平足以进行原理验证实验以确定SR1078处理是否会刺激动物模型中的ROR靶基因表达。用SR1078（10mg / kg ip）处理小鼠，并在注射后2小时收获肝脏并纯化mRNA用于评估G6Pase和FGF21基因表达。通过SR1078处理对载体显着刺激FGF21和G6Pase的表达。控制[1]。

激酶实验

进行ALPHA筛选测定。在室温下在绿光条件下（<100勒克斯），在白色不透明384孔板中一式三份进行测定。最终测定体积为20μL。所有稀释液均在测定缓冲液（100mM NaCl，25mM Hepes，0.1％（w / v）BSA，pH7.4）中制备。最终的DMSO浓度为0.25％（v / v）。将12μLGST-RORγ-LBD（10nM），珠子（12.5μg/ mL每种供体和受体）和4μL浓度增加（210nM-50μM）的化合物SR1078的混合物加入到孔中，将板密封并孵育1小时。在该预温育步骤后，加入4μL生物素-TRAP220-2肽（50nM），将板密封并进一步温育2小时。在PerkinElmer Envision 2104上读板，并使用GraphPad Prism软件[1]分析数据。

细胞实验

将HEK293细胞维持在补充有10％（v / v）胎牛血清的Dulbecco改良的Eagle培养基（DMEM）中，37℃，5％CO 2下。维持HepG2细胞并在补充有10％（v / v）胎牛血清的最低必需培养基中在37℃，5％CO 2下常规繁殖。在脂质和甾醇耗尽的实验中，将细胞维持在活性炭处理的血清（10％（v / v）胎牛血清）上，并用7.5μM洛伐他汀和100μM甲羟戊酸处理。转染前24小时，将HepG2或HEK293细胞以15×103细胞/孔的密度接种在96孔板中。使用LipofectamineTM 2000进行转染。转染后16小时，用载体或SR1078处理细胞。处理后24小时，使用Dual-GloTM荧光素酶测定系统测量荧光素酶活性。实验重复至少三次[1]。

动物实验

小鼠[1]通过ip注射给予C57BL6小鼠（每个时间点n = 3）评估SR1078的血浆水平。在1,2,4和8h后取血。在2小时的时间点，肝脏用于靶基因分析。使用标准离心技术产生血浆，并将血浆和组织在-80℃下冷冻。将血浆和组织分别与乙腈（1：5（v / v）或1：5（w / v））混合，用探针尖端超声波仪超声处理，并通过液相色谱/串联质谱分析药物水平。

参考文献

[1]. Wang Y, et al. Identification of SR1078, a synthetic agonist for the orphan nuclear receptors RORα and RORγ. ACS Chem Biol. 2010 Nov 19;5(11):1029-34.

密度

1.5±0.1 g/cm3

沸点

362.9±42.0 °C at 760 mmHg

熔点

169℃

分子式

C17H10F9NO2

分子量

431.252

闪点

173.3±27.9 °C

精确质量

431.056793

PSA

52.82000

LogP

5.27

蒸汽压

0.0±0.9 mmHg at 25°C

折射率

1.493

N-[4-(1,1,1,3,3,3-Hexafluoro-2-hydroxy-2-propanyl)phenyl]-4-(trifluoromethyl)benzamide

sr1078

sr1078||sr-1078

cs-1045

Benzamide, N-[4-[2,2,2-trifluoro-1-hydroxy-1-(trifluoromethyl)ethyl]phenyl]-4-(trifluoromethyl)-