名称：11668019脂质体2000  现货

规格：1.5ml/ 0.75ml

品牌：Invitrogen原装

供应商：上海创赛

11668019脂质体2000 说明：脂质体2000是专门用于将核酸转染进入真核细胞的一种形式，

我们提供下列的建议： 在多种细胞和培养板中都有很高的转染效率。

在网上列出的细胞类型中都获得了较高的转染效率。  

核酸-脂质体2000的复合物可以直接加入到细胞培养液中，无论是有血清还是无血清的情况。  

转染之后不用移除复合物或者更换培养液，但是复合物应在转染后4-6h移除。

 转染的一些重要指导 DNA转染使用page3  我们建议使用Opti-MEM I reduced serum  培养基来稀释11668019脂质体2000和核酸。 

转染时不要向培养基中加入抗生素。 在实验过程中要保持一样的条件

DNA转染  使用下列方法在24孔板内转染DNA进入哺乳动物细胞。对于其他的板子，

可以参考page4.所有的数量和体积都是基于一个孔的剂量。

准备复合物使DNA（ug）：脂质体（ul）的比例为1:2到1:3。

转染时细胞密度较高可以获得高的效率，高的表达水平，以及使毒性降低。

条件的选择很重要。  1. 贴壁细胞：在转染前一天，向24孔板内接种0.5-2*105个细胞，使得细胞在转染时融合 率达到90-95%。

切记使用不含抗生素的培养基。 

2. 对于每一个转染样品，按照如下方法准备复合物：  

A． 使用无血清的培养基将DNA稀释为50ul，温和混匀。 

B． 使用前混匀11668019脂质体2000，然后用培养基将一定量的脂质体2000稀释为50ul。室温 孵育5min。  进行到c时间不超过25min      

C．5min的孵育后，混合稀释的DNA和稀释的脂质体2000（总体积为100ul）。温和混匀，室温孵育20min（溶液呈现云雾状）。        

 混合物在室温可稳定存在6h。  

3. 向含有细胞和培养液的板子中每孔加入100ul的复合物，通过敲打板子和来回晃动使其 混合均匀。  

4. 细胞孵育18-48h后可检测转染情况。培养液可在转染4-6h后更换。 

5. 对稳定的细胞系：传代细胞在转染后以1:10的比例加入新鲜的培养液。

第二天加入选择 培养基。   优化转染  为了获得高的转染效率和低毒性，通过调整细胞浓度和DNA11668019脂质体2000的比例来优化转染条件。

确保细胞90%的融合，以及DNA(ug)：脂质体（ul）比例在1:0.5到1:5。    

转染条件的浮动    转染到不同类型的培养板中，

脂质体2000的，核酸的量，细胞数以及合适的培养基量，都在下表中显示。在96孔板中，建议总体积到50ul

Lipofectamine® 2000转染试剂是一种多用途转染试剂，可在各种贴壁和悬浮细胞系中提供高效转染。研究人员可使用Lipofectamine® 2000试剂进行基于siRNA和shRNA的基因敲除实验及基因表达研究。Lipofectamine® 2000是Life Technologies提供的用于siRNA和质粒DNA共转染的*试剂。

采用Lipofectamine® 2000试剂，您可以实现：

? 在各种细胞系中具有*的转染效率和高重组蛋白表达水平 (表1)

? 出众的siRNA和质粒DNA共转染性能

? 在血清存在时亦具有可靠的转染效率 – 转染后无需更换培养基

? 适用于高通量应用的可靠性能

? 建立稳定细胞系的*选择

适用于基因表达和基因沉默的高性能转染试剂

Lipofectamine® 2000试剂适合所有常见细胞系及许多难以转染的细胞系，可用于含有或不含血清的培养基。在基因沉默应用中，Lipofectamine® 2000试剂的高效转染提供了很高的基因敲除水平，足以获得令人信服的结果。Lipofectamine® 2000试剂可实现siRNA和质粒DNA的高效转染，它是共转染的*试剂。Lipofectamine® 2000试剂使用方便 – 只需将其与核酸混合，加入细胞培养物即可。

适合高通量操作

Lipofectamine® 2000试剂使用简单、快速且具有很高的转染效率，适用于瞬时蛋白表达或高通量RNAi转染。在上述应用中，可轻松建立自动化或机器人系统转染条件。如需了解有关Lipofectamine® 2000的实验方案、文献引证及其它产品信息，可登录细胞系数据库。

仅供研究使用。不得用于人或动物的治疗或诊断。