解析|877399-52-5|(R)-Crizotinib参考用途

常用名

克唑替尼

英文名

Crizotinib

CAS号

877399-52-5

分子量

450.337

密度

1.5±0.1 g/cm3

沸点

599.2±50.0 °C at 760 mmHg

分子式

C21H22Cl2FN5O

熔点

无资料

闪点

316.2±30.1 °C

体外研究

PF-2341066在mIMCD3小鼠或MDCK犬上皮细胞中显示出相似的针对c-Met磷酸化的效力，IC50分别为5nM和20nM。与NIH3T3细胞相比，PF-2341066显示出针对NIH3T3细胞的改善或相似的活性，所述NIH3T3细胞经工程改造以表达c-Met ATP结合位点突变体V1092I或H1094R或P-环突变体M1250T，IC50分别为19nM，2nM和15nM。表达野生型受体，IC50为13 nM。相反，与野生型受体相比，观察到针对经工程改造以表达c-Met活化环突变体Y1230C和Y1235D的细胞的PF-2341066效力的显着变化，IC50分别为127nM和92nM。 PF-2341066还有效地阻止了NCI-H69和HOP92细胞中c-Met的磷酸化，IC50分别为13 nM和16 nM，分别表达内源性c-Met变体R988C和T1010I [1]。 PF-2341066还有效抑制Karpas299或SU-DHL-1 ALCL细胞中的NPM-ALK磷酸化，IC50为24 nM。 PF-2341066有效阻止细胞增殖，这与ALK阳性ALCL细胞中G（1）-S期细胞周期停滞和诱导细胞凋亡有关，IC50为30 nM，而ALK阴性淋巴瘤细胞则不然[2]。此外，PF-2341066可预防与原发肿瘤生长（即增殖和存活）以及转移相关的骨肉瘤行为[3]。

体内研究

PF-2341066显示在50 mg / kg /天和75 mg / kg /天治疗队列中引起大规模肿瘤（> 600 mm3）明显消退的能力，平均肿瘤体积减少60％。 GTL-16模型中的日常管理计划。在另一项研究中，PF-2341066显示出完全抑制GTL-16肿瘤生长> 3个月的能力，12个小鼠中只有1只在3个月的治疗方案中显示出50mg / kg /的肿瘤生长显着增加。天。在GTL-16肿瘤中观察到12.5mg / kg /天，25mg / kg /天和50mg / kg /天的CD31阳性内皮细胞的显着剂量依赖性减少，表明MVD的抑制显示剂量与抗肿瘤疗效的相关性。 PF-2341066在GTL-16和U87MG模型中显示出人类VEGFA和IL-8血浆水平的显着剂量依赖性降低。 po给予PF-2341066后，在GTL-16肿瘤中观察到磷酸化c-Met，Akt，Erk，PLCλ1和STAT5水平的显着抑制[1]。 PF-2341066可预防与原发性肿瘤生长和转移相关的骨肉瘤行为。在通过口服强饲法用PF-2341066处理的裸鼠中，PF-2341066预防了骨肉瘤异种移植物的生长和相关的骨溶解和皮层外骨基质的形成[3]。用50mg / kg PF-2341066处理c-MET-扩增的GTL-16异种移植物引起肿瘤消退，其与18F-FDG摄取的缓慢减少和降低葡萄糖转运蛋白1，GLUT-1的表达相关[4]。

激酶实验

将细胞接种于96孔板中的补充有10％胎牛血清（FBS）的培养基中，并在24小时后转移至无血清培养基[含0.04％牛血清白蛋白（BSA）]。在研究配体依赖性RTK磷酸化的实验中，添加相应的生长因子长达20分钟。在用PF-2341066孵育细胞1小时和/或适当的配体指定时间后，用补充有1mM Na 3 VO 4的HBSS洗涤细胞一次，并从细胞产生蛋白质裂解物。随后，通过夹心ELISA方法评估所选蛋白激酶的磷酸化，使用用于包被96孔板的特异性捕获抗体和对磷酸化酪氨酸残基特异的检测抗体。将抗体包被的平板（a）在蛋白质裂解物存在下于4℃温育过夜; （b）在PBS中的1％吐温20中洗涤7次; （c）在辣根过氧化物酶偶联的抗 - 总 - 磷酸酪氨酸（PY-20）抗体（1：500）中孵育30分钟; （d）再次洗七次; （e）在3,3'，5,5'-四甲基联苯胺过氧化物酶底物中温育以引发比色反应，通过加入0.09N H 2 SO 4终止反应; （f）使用分光光度计测量450nm的吸光度。